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    孔闆成像好方法 — 真彩色白光透射

    孔闆成像是(shì)分子(zǐ)生物實驗中必不(bù)可少的(de)實驗方案,其中孔闆成像還可以(yǐ)用于(yú)病毒噬菌斑的(de)計算和(hé / huò)計數。


    其主要(yào / yāo)的(de)原理是(shì)将各稀釋度的(de)病毒液接種到(dào)單層細胞培養環境中,吸附一(yī / yì /yí)段時(shí)間後,在(zài)單層細胞上(shàng)覆以(yǐ)瓊脂糖,病毒感染細胞并在(zài)細胞中增殖,使細胞破裂死亡。由于(yú)固體介質的(de)限制,釋放的(de)病毒隻能由最初感染的(de)細胞向四周擴展。經過幾個(gè)增殖周期,便形成一(yī / yì /yí)個(gè)局限性病變細胞區,即病毒蝕斑。經中性紅活細胞染料着色後,活細胞顯紅色,而(ér)蝕斑區細胞而(ér)不(bù)着色,形成不(bù)染色區域。病毒蝕斑如噬菌體感染細菌形成的(de)噬菌斑。理論上(shàng),當病毒液充分稀釋後,獲得的(de)每個(gè)蝕斑均源于(yú)最初感染細胞的(de)一(yī / yì /yí)個(gè)病毒顆粒,即蝕斑中的(de)病毒爲(wéi / wèi)一(yī / yì /yí)個(gè)病毒體的(de)繁殖後代品系,由此達到(dào)純化病毒的(de)目的(de)。除了(le/liǎo)可用于(yú)純化病毒以(yǐ)外,空斑實驗還可用于(yú)幹擾素、抗體中和(hé / huò)病毒繁殖能力的(de)實驗。

    而(ér)目前該類實驗主要(yào / yāo)采用顯微鏡成像的(de)方式進行觀察和(hé / huò)記錄。Cytiva新一(yī / yì /yí)代的(de)多功能生物分子(zǐ)成像設備Amersham ImageQuant 800能夠利用白光透射模式,對孔闆中的(de)病毒噬菌斑進行真彩色成像光密度精準定量和(hé / huò)自動化數據分析。


    圖片


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    顯微鏡的(de)拍照雖然方便,但是(shì)儲存數據和(hé / huò)做定量分析非常麻煩。

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