摘要(yào / yāo)

本文案例分析了(le／liǎo)Thermo Scientific Varioskan LUX多功能酶标儀（以(yǐ)下簡稱Varioskan LUX）及其氣體控制模塊在(zài)細胞動力學測量中的(de)應用。通過這(zhè)項技術，研究者能夠在(zài)控制CO2和(hé / huò)O2濃度的(de)環境中進行長時(shí)間細胞培養和(hé / huò)動力學分析，從而(ér)提高了(le／liǎo)實驗的(de)準确性和(hé / huò)效率。

Varioskan LUX多功能酶标儀

Varioskan LUX是(shì)一(yī / yì ／yí)款多功能酶标儀，能夠進行吸光度、熒光強度、化學發光、時(shí)間分辨熒光和(hé / huò)AlphaScreen等五功能檢測。其氣體控制模塊能夠同時(shí)控制CO2和(hé / huò)O2水平，爲(wéi / wèi)細胞培養提供一(yī / yì ／yí)緻的(de)生理條件。

技術背景

在(zài)藥物和(hé / huò)學術研究中，基于(yú)細胞的(de)檢測通常需要(yào / yāo)精确控制CO2和(hé / huò)O2的(de)濃度。Varioskan LUX的(de)集成氣體控制模塊可以(yǐ)在(zài)長時(shí)間動力學研究中維持細胞培養的(de)生理條件，确保數據的(de)連續性和(hé / huò)準确性。

▲Variskan LUX 多功能酶标儀中的(de)氣體濃度

在(zài)SkanIt軟件中很容易被調整和(hé / huò)監控

 ▲Nunc Edge‑96孔闆帶有填充的(de)邊緣，

可作爲(wéi / wèi)被動濕度控制

實驗方法

細胞在(zài)37℃和(hé / huò)5% 的(de)CO2條件下根據标準程序培養并傳代，使用細胞培養箱（Thermo ScientificTMHeracellTM150）進行培養。每孔含1000個(gè)細胞，用90微升培養基接種到(dào)兩個(gè)96孔闆中；在(zài)加入PrestoBlue試劑（10微升）前，先在(zài)培養箱中孵育2小時(shí)。

PrestoBlue試劑是(shì)一(yī / yì ／yí)種即用型細胞可滲透的(de)瑞沙脲基溶液，它利用活細胞的(de)還原能力作爲(wéi / wèi)細胞活力指示劑，定量測量細胞增殖。當加入到(dào)細胞時(shí)，PrestoBlue試劑被活細胞的(de)還原環境修飾并高度熒光化。這(zhè)種顔色變化可以(yǐ)通過熒光來(lái)檢測。

在(zài)測量室中保持溫度爲(wéi / wèi)37℃，CO2濃度爲(wéi / wèi)5%，用Varisikan Lux儀器每小時(shí)測一(yī / yì ／yí)次熒光（激發波長560nm，發射波長590nm，底讀），測72小時(shí)。 同時(shí)進行未控制CO2水平的(de)實驗作爲(wéi / wèi)對照。

▲有或沒有CO2控制的(de)情況下，在(zài)Varioskan LUX儀器中進行了(le／liǎo)HeLa細胞72小時(shí)的(de)動力學生長研究。繪制了(le／liǎo)熒光值減去基線48個(gè)重複的(de)平均曲線圖。

▲在(zài)爲(wéi / wèi)期72小時(shí)的(de)測量期間，VarisKan LUX儀器中的(de)二氧化碳含量保持穩定。SkanIt軟件在(zài)每個(gè)測量的(de)運行日志中記錄氣體濃度。

實驗結果

實驗結果表明，在(zài)Varioskan LUX儀器中控制CO2水平對于(yú)長時(shí)間動力學細胞檢測至關重要(yào / yāo)。使用PrestoBlue試劑，研究者能夠監測活細胞在(zài)72小時(shí)生長期内的(de)增殖情況。結果顯示，在(zài)CO2控制條件下的(de)HeLa細胞顯示出(chū)顯著的(de)增殖，而(ér)在(zài)未控制CO2的(de)條件下，熒光信号變化不(bù)顯著。

結論

Varioskan LUX的(de)集成氣體控制模塊爲(wéi / wèi)細胞動力學測量提供了(le／liǎo)多項優勢，包括節省實驗台空間、無數據間隙、通過SkanIt軟件輕松調整氣體濃度、同時(shí)或分别控制CO2和(hé / huò)O2、良好的(de)氣體濃度穩定性以(yǐ)及運行時(shí)氣體濃度記錄的(de)可追溯性。

應用案例分析

Varioskan LUX多功能酶标儀在(zài)細胞動力學測量中的(de)應用，展示了(le／liǎo)其在(zài)生物醫學研究中的(de)高效性和(hé / huò)實用性。通過精确控制細胞培養環境，研究者能夠獲得更可靠和(hé / huò)準确的(de)實驗數據，從而(ér)推動科學發現。