超微量分光光度計作爲(wéi / wèi)常用的(de)核酸、蛋白等生物大(dà)分子(zǐ)的(de)定量和(hé / huò)表征工具，廣泛應用于(yú)生命科學和(hé / huò)生物制藥等領域，用戶僅需微量樣品即可獲得濃度及吸光度結果。然而(ér)在(zài)日常使用中，一(yī / yì ／yí)些用戶會對測量結果有疑慮，尤其是(shì)當測量結果與預估的(de)結果出(chū)現較大(dà)差異，或與使用其他(tā)方法的(de)定量結果有差異時(shí)，用戶往往會懷疑設備出(chū)現問題或故障。

實際上(shàng)，作爲(wéi / wèi)精密的(de)分析儀器，設備出(chū)現問題的(de)幾率并不(bù)高，尤其是(shì)當設備正常使用和(hé / huò)日常維護時(shí)，更多的(de)問題可能由外部因素導緻，如樣品的(de)均質、顆粒物或氣泡幹擾等。本文提所列的(de)方法可幫助您判定設備的(de)狀态，以(yǐ)便您放心的(de)進行測量工作。

标準品測量

常用的(de)标準品可使用BSA或核酸标準品，可從各試劑廠家購買，或使用如BCA定量試劑盒，QUBIT核酸定量試劑盒中的(de)标準品。請注意标準品要(yào / yāo)在(zài)效期之(zhī)内，且保存得當（通常低溫）。也(yě)可以(yǐ)使用設備廠家提供的(de)小分子(zǐ)化合物标準品，如Implen提供的(de)PHP标準品。标準品是(shì)有等級區分的(de)，通常附帶有檢定證書的(de)标準品，标稱濃度會更準确。

    特别指出(chū)的(de)是(shì)，使用未知濃度的(de)樣品，來(lái)評估不(bù)同設備的(de)測量結果，并以(yǐ)其中一(yī / yì ／yí)台作爲(wéi / wèi)基準，判定另外一(yī / yì ／yí)台的(de)準确性，是(shì)完全錯誤的(de)。

重複性測量

在(zài)缺乏标準品，或标準品由于(yú)保存不(bù)當狀态已存疑時(shí)，可使用未知濃度樣品做重複性測試。這(zhè)可以(yǐ)判斷設備的(de)穩定性，以(yǐ)排除一(yī / yì ／yí)些潛在(zài)問題，如樣品台損壞、樣品的(de)非均質，成分幹擾等。雖然不(bù)能确定準确性誤差，但重複性很好的(de)設備，很大(dà)幾率是(shì)沒有大(dà)問題的(de)。當然，這(zhè)需要(yào / yāo)結合您的(de)允差要(yào / yāo)求，綜合考量。

梯度稀釋測量

使用已知濃度或未知濃度的(de)樣品，均可進行梯度稀釋測量，以(yǐ)驗證設備的(de)線性穩定性。使用設備的(de)标準曲線功能可便捷地(dì / de)完成此項測試，并給出(chū)線性回歸。當梯度稀釋的(de)R2趨近于(yú)1，設備的(de)線性完全可滿足廣泛的(de)動态範圍内的(de)測量要(yào / yāo)求，同時(shí)也(yě)可反映設備的(de)良好狀态。需要(yào / yāo)注意的(de)是(shì)，梯度稀釋時(shí)要(yào / yāo)選擇定期校準過的(de)，準确性好的(de)移液器，且正确操作。

基線穩定性測量

光源和(hé / huò)CCD檢測器，作爲(wéi / wèi)設備的(de)核心組件，其穩定性對于(yú)設備而(ér)言是(shì)非常重要(yào / yāo)的(de)，而(ér)基線測量可以(yǐ)很好地(dì / de)反映這(zhè)些部件的(de)狀态。使用水（或空氣）作爲(wéi / wèi)空白，并且用水（或空氣）作爲(wéi / wèi)樣品，做多次重複測量，如果吸光值的(de)漂移很小，通常可反映設備的(de)光學系統組件狀态正常。

光譜曲線

正常的(de)核酸和(hé / huò)蛋白質樣品，或者其他(tā)化合物樣品，都具有典型的(de)吸收曲線。異常的(de)曲線往往說(shuō)明樣品的(de)問題，或設備光路系統可能存在(zài)的(de)問題。光譜曲線可作爲(wéi / wèi)測量結果可靠性的(de)參考，且多數設備可根據曲線給出(chū)樣品潛在(zài)問題的(de)警告。

 通過以(yǐ)上(shàng)測試方法，可以(yǐ)評估設備的(de)狀态和(hé / huò)試驗數據的(de)可靠性。實際工作中，由于(yú)設備本身原因導緻的(de)測量不(bù)準确畢竟是(shì)占少數的(de)。規範操作，正确使用應是(shì)用戶更應關切的(de)核心。後續，我們将爲(wéi / wèi)您解讀關于(yú)超微量測量樣品時(shí)的(de)一(yī / yì ／yí)些常見誤區，希望您持續關注，更加惬意地(dì / de)使用您的(de)Nanophotometer®。