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紫外-可見(UV-Vis)分光光度計通過測量紫外和(hé / huò)可見光波段的(de)光吸收對樣品進行定量和(hé / huò)鑒定。分光光度計的(de)曆史前身可以(yǐ)追溯到(dào)1814年,當時(shí)約瑟夫·馮·弗勞恩霍夫(Joseph von Fraunhofer)(弗勞恩霍夫應用研究促進協會的(de)贊助人(rén))利用自己發明的(de)分光光度計測量太陽光并發現太陽光譜中的(de)574條暗譜線(弗勞恩霍夫線)。
而(ér)一(yī / yì /yí)台商用紫外-可見分光光度計是(shì)阿諾德·貝克曼在(zài)1941年推出(chū)的(de),該儀器利用石英棱鏡将鎢燈發出(chū)的(de)光分離爲(wéi / wèi)吸收光譜,并利用光電管(光電二極管的(de)前身)記錄信号。爲(wéi / wèi)了(le/liǎo)說(shuō)明光源和(hé / huò)電子(zǐ)設備的(de)背景影響,紫外-可見分光光度計測量通過樣品的(de)光的(de)強度,并自動減去背景,以(yǐ)提供代表樣品測定特性的(de)精确讀數。
分光光度計發展到(dào)今天,已成爲(wéi / wèi)生命科學、醫藥科學、分析化學等領域重要(yào / yāo)的(de)儀器。而(ér)超微量分光光度計的(de)出(chū)現,讓分析所需的(de)樣品量降低至微升級别,特别适合于(yú)生命科學珍貴樣品的(de)的(de)定量分析。Implen于(yú)2005年推出(chū)的(de)Label Guard超微量比色皿,使任何用戶都可以(yǐ)在(zài)常規紫外分光光度計上(shàng)進行微量樣品測量,而(ér)2006上(shàng)市的(de)Nanophotometer®系列超微量分光光度計,标志了(le/liǎo)“後分光“時(shí)代的(de)開始。
微量紫外-可見分光光度計與常規的(de)分光光度計相比,有着不(bù)同的(de)設備結構,其特性是(shì)能夠于(yú)獲得全光譜分析結果,使得核酸、蛋白質等樣品可被定量及分析。常規分光光度計常采用前置分光器(如光栅),使光源發出(chū)的(de)複色光分光爲(wéi / wèi)單色光,這(zhè)能夠讓入射光保持很好的(de)單色性,單色光穿過樣品池産生吸收,由二極管或倍增管檢測器檢測光強度。當光栅進行轉動時(shí),就(jiù)會有不(bù)同波長的(de)單色光逐一(yī / yì /yí)通過樣品池,這(zhè)時(shí)就(jiù)可進行光譜掃描測量。
雖然在(zài)靈敏度、噪音、雜散光等方面具備優勢,但光譜掃描所需的(de)時(shí)間往往是(shì)較長的(de),這(zhè)并不(bù)太适合于(yú)生命科學樣品的(de)定量及光譜分析。因此,目前市面上(shàng)大(dà)多數的(de)用于(yú)測量生命科學樣品的(de)微量分光光度計采用的(de)是(shì)相反的(de)光學結構,即“後分光”形式。
由氙燈光源發出(chū)的(de)複色光,通過樣品(微量或比色皿樣品),在(zài)相應的(de)波長下分别産生吸收,減弱的(de)複色出(chū)射光通過分光器進行分光,後由陣列式檢測器同時(shí)檢測所有波長對應的(de)吸光值。陣列式檢測器通常爲(wéi / wèi)CCD,爲(wéi / wèi)長條形結構,每個(gè)像元組能夠精确的(de)檢測對應的(de)波長。因此,嚴謹的(de)說(shuō),微量分光光度計的(de)全光譜測量,是(shì)無需“掃描“的(de)”,而(ér)是(shì)同時(shí)獲得的(de)。
因此,微量分光光度計的(de)核心部件中,氙燈替代了(le/liǎo)鎢燈氘燈組,後分光結構替代了(le/liǎo)前分光結構,陣列式CCD檢測器替代了(le/liǎo)光電二極管檢測器。在(zài)同時(shí),也(yě)完全能夠滿足樣品測量準确性的(de)要(yào / yāo)求,可謂是(shì)爲(wéi / wèi)大(dà)分子(zǐ)定量分析量身定制的(de)儀器。而(ér)Nanophotometer®出(chū)衆的(de)全光譜測量性能,也(yě)廣泛應用于(yú)分析化學領域。
後分光的(de)結構還有其優勢,由于(yú)分光器是(shì)固定的(de),無需轉動進行光譜掃描,因此波長的(de)穩定性是(shì)非常好的(de)。而(ér)掃描式分光光度計必須考慮分光器轉動導緻的(de)波長漂移問題,需要(yào / yāo)定期檢測或調整。在(zài)後面幾期我們将介紹儀器的(de)檢定問題,會具體介紹。
無論是(shì)前分光,還是(shì)後分光,都各具特點,也(yě)适合于(yú)不(bù)同的(de)應用需求。充分的(de)了(le/liǎo)解構造和(hé / huò)原理,有助于(yú)您合理的(de)選擇和(hé / huò)正确的(de)使用儀器。德國(guó)Implen 18年來(lái)一(yī / yì /yí)直專注于(yú)微量樣品吸光度測量領域,我們以(yǐ)豐富的(de)制造和(hé / huò)應用經驗爲(wéi / wèi)用戶提供有效的(de)産品,也(yě)熱衷于(yú)分享知識與傳遞價值。Implen是(shì)值得您信賴的(de)超微量品牌。